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使用全自動凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)的含量實驗方法


發(fā)布時間:2015-02-10

使用全自動凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)的含量實驗方法

全自動凱氏定氮儀主要用于糧油檢測、飼料分析、土肥檢測等領(lǐng)域中的谷物、食品、飼料中氮含量的檢測分析,它的性能正常與否直接影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。面對各類不同型號的全自動凱氏定氮儀,國家至今還沒有針對該類儀器的校準(zhǔn)規(guī)范。開展對全自動凱氏定氮儀校準(zhǔn)方法的研究,以達(dá)到正確評價其計量性能的技術(shù)要求,保證測量數(shù)據(jù)的可比性、量值溯源與傳遞的*性,為今后規(guī)程的制定提供參考。此外分析了儀器使用中碰到的故障問題,對更好的進(jìn)行儀器校準(zhǔn)及維護(hù),提高檢測的準(zhǔn)確度、提升檢測能力和水平都有一定的幫助。 
目前,蛋白質(zhì)測定*常用的方法是凱氏定氮法,其通過測定總有機(jī)氮含量來確定蛋白質(zhì)含量,可用于各類農(nóng)作物和食品中蛋白質(zhì)含量測定,國內(nèi)外應(yīng)用較為普遍,至今仍被作為標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法。為了提高工作效率和準(zhǔn)確度,將凱氏定氮裝置換成消化爐和全自動凱氏定氮儀代替人工操作,可一次性消化20個樣品管,儀器自動連續(xù)完成加水稀釋、加堿、加酸、蒸餾、滴定、消化管排空和結(jié)果計算,快速、準(zhǔn)確。因此,全自動凱氏定氮儀在農(nóng)業(yè)、食品、化工、醫(yī)藥衛(wèi)生等領(lǐng)域的粗蛋白質(zhì)含量測定方面有著巨大的優(yōu)勢和應(yīng)用前景?!?br/>為保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性和重現(xiàn)性,在實驗室條件允許的情況下,使用全自動凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)含量,可減少蒸餾、滴定等過程中人為因素造成的誤差,操作過程中被測樣品應(yīng)是均勻的,當(dāng)樣品放入消化管時,不要黏附在管壁上以免出現(xiàn)碳粒,萬一黏附可在加酸時緩慢沖下,以免被檢樣品消化不完全,使結(jié)果偏低。樣品消化液必須含有過量的硫酸,以防止氨的損失。消化時間要掌握好,一般為60~90min,時間過長會引起氨的損失;消化時間不夠或消化不完全會導(dǎo)致總氮量偏低。一定要將消化管放入通風(fēng)櫥中,并注意控制消化溫度,剛開始消化時應(yīng)用小火加熱,后調(diào)至420℃使消化管內(nèi)的反應(yīng)物先碳化變黑再沸騰。

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